cDNA amplification kits for 5′ and 3 ‘ RACE

Rapid amplification of cDNA ends (RACE) is een techniek die wordt gebruikt om de volledige sequenties van RNA-transcripten te verkrijgen. RACE kan de sequentie van een RNA transcript van een korte, bekende sequentie binnen het transcript helemaal tot de 5′ end (5′ RACE-PCR) of 3′ end (3′ RACE-PCR) van het RNA.

de SMARTer RACE 5′ / 3 ‘ Kit is een verbeterde versie van de SMARTer RACE cDNA Amplification Kit. De slimmere RACE 5’ / 3 ‘ Kit biedt verbeterde gevoeligheid, Minder achtergrond en hogere specificiteit ten opzichte van de vorige generatie kits. Eerste-streng cDNA gegenereerd met deze uitrusting kan direct worden gebruikt in 5′- en 3′-RACE PCR reacties. Het slimmere protocol omvat geen van de adapter ligatie stappen die andere RACE kits bevatten, waardoor het protocol korter en aanzienlijk gemakkelijker uit te voeren. De nieuwe kit is ook ontworpen om grotere RNA-ingangsvolumes (tot 11 µl) op te vangen en is aangetoond efficiënter te presteren op uitdagende doelen (bijv., die lang zijn, GC-rijk, enz.). De uitrusting omvat onze hoogst robuuste Seqamp DNA-Polymerase voor versterking van producten, en de in-Fusion HD het klonen uitrusting voor efficiënt het klonen van RASFRAGMENTEN in de verstrekte linearized vector. De slimmere RACE 5’ / 3 ‘ – procedure combineert slimme eerste-streng cDNA-synthesetechnologie met een krachtige onderdrukking PCR-protocol dat de achtergrondversterking vaak geassocieerd met RACE-protocollen aanzienlijk vermindert.

• gebruiksvriendelijk-Het slimmere RACE-protocol wordt uitgevoerd in een enkele buis, en minimaliseert de behandeling van zowel uw RNA-monster als uw gesynthetiseerde cDNA. Totale hands-on tijd is slechts vier uur.
• Complete kit – de slimmere RACE 5′ / 3 ‘ Kit bevat alle benodigde componenten (behalve genspecifieke primers) om uw proces te stroomlijnen. Met deze enige uitrusting, kunt u de synthese van eerste bundel cDNA beginnen en door de fragmenten van het klonen van het ras doorgaan, succesvolle klonen op dag twee terugkrijgen.
• vereist slechts 10 ng van totaal RNA-onze slimmere RASMETHODE stelt u in staat om kleine monsters te gebruiken, waaronder biopsieën, weefseldissecties, aspiraties van naalden en embryonale en zeldzame ziekteweefsels. Dit geoptimaliseerde protocol vermindert beduidend niet-specifieke achtergrond, die voor analyse van kleine input nuttig is.
• specifieke verrijking voor 5 ‘ends-onze zorgvuldig ontworpen, chemisch behandelde slimmere Oligo bij voorkeur hybridiseert tot de 5′ ends van de cDNA wordt gesynthetiseerd. Met behulp van deze slimmere Oligo, onze procedure verrijkt cDNA pools voor 5’ sequenties, waardoor de waarschijnlijkheid dat u de volledige sequentie van uw gen of de upstream regulerende regio ‘ s zal versterken.
• geen RNA-voorbehandeling vereist-onze slimmere RASMETHODE vereist geen RNA-voorbehandeling met DNase. Dit protocol werkt met totaal RNA, evenals met steekproeven die met genomic DNA kunnen worden besmet.

gerelateerde producten

Marathon cDNA Amplification Kit

de Marathon cDNA Amplification Kit methode maakt gebruik van een speciaal ontworpen adapter die de achtergrond aanzienlijk vermindert en het mogelijk maakt om zowel 5′- als 3′-RACEREACTIES ((Bertling, Beier, and Reichenberger 1993; Frohman 1993) uit te voeren met dezelfde template. Marathon cDNA versterking kan worden gebruikt om veelvoudige RNAs snel te karakteriseren die door uitgedrukte opeenvolgingsmarkeringen worden geà dentificeerd (ESTs), differentiële vertoning, het vingerafdrukken nemen van RNA, of cDNA-aftrekking. Marathon cDNA synthese begint met poly a + RNA en een gewijzigde lock-docking oligo(dT) primer die twee gedegenereerde nucleotiden bij het 3′ einde bevat. Deze nucleotiden positioneren de primer aan het begin van de poly a-staart, waardoor de 3′ heterogeniteit die inherent is aan conventionele oligo(dT) priming wordt geëlimineerd. Na de synthese van cDNA, worden de botte einden gecreeerd en wordt de Marathonadapter aan beide einden van double-stranded cDNA ligated.

opmerking: De Marathon cDNA-versterkingsset vereist de Advantage 2 PCR-Kit (Cat. # 639206).

RACE-ready cDNA ‘s

wij bieden ook RACE-ready cDNA’ s aan, dit zijn dubbelstrengs cDNA ‘ s gemaakt van hoogwaardig premium poly a+ RNA en gelieerd aan de Marathonadapter. Deze cDNAs zijn klaar voor 5’-en 3 ‘ – ras PCR en zijn beschikbaar van een brede waaier van weefsels en celtypes.