Immunodeficient Mus For Kreftstudier: Hvilken vertsstamme skal jeg bruke?

det er et greit spørsmål med et ikke så enkelt svar!

Fire klasser av immunsvikt mus

JAX distribuerer en rekke immunsvikt stammer som kan deles inn i fire hovedkategorier:

• «Naken» mus
• «Scid» mus
• «Rag-mangelfull» mus
• «Høyere orden, multigenic» immunsvikt mus

A JAX Notater artikkelen beskriver grundig disse tilbudene. Kort sagt,» naken «mus er homozygot For Foxn1nu, eller» naken » mutasjon. Foxn1 koder en transkripsjonsfaktor som kreves for både hårsekk og tymisk utvikling. I fraværet er mus både hårløse og athymiske. Fordi thymus ikke dannes, er DET ikke noe sted FOR CD4+ OG CD8 + t-celler å skille og modne, noe som gjør nakenhomozygoter T-cellemangel.

«Scid» – mus er homozygote For Prkdcscid-mutasjonen. Genet Prkdc koder for den katalytiske underenheten AV DNA-avhengig proteinkinase som er nødvendig FOR DNA-reparasjon og for tetting av dobbelttrådede DNA-brudd som oppstår under Somatisk rekombinasjon av t-cellereseptor (TCR) og immunglobulin (ig) gener. I fravær Av Prkdc protein, TCR og ig gener kan ikke omorganisere, noe som resulterer i mus som er Både T-og B-celle mangelfull.

«Rag-mangelfulle» mus er mus som ikke klarer å uttrykke funksjonelle Rag1 eller Rag2 proteiner. Som Prkdc-genet er Både Rag1 og Rag2 nødvendig for somatisk rekombinasjon AV tcr-og Ig-gener, og fraværet av begge genene resulterer i t-og B-cellemangel. Mus som bærer Enten Rag1tm1Mom eller Rag2tm1.1cgn mutasjoner har svært like, om ikke identiske, fenotyper.

Endelig er» høyere orden, multigene » immunodeficiente mus konstruert fra Enten Prkdcscid eller Rag-mangelfulle mus, og bærer ytterligere immundefektforsterkende mutasjoner. Blant disse musene er våre nsg-og NRG-mus, som bærer en spesifikk mutasjon i interleukin 2-reseptor gamma-subenheten gen (Il2rgtm1Wjl) i kombinasjon med Henholdsvis Prkdcscid og Rag1tm1Mom. Disse musene er B, T og NK celle mangelfull. I tillegg, fordi de begge har nod / ShiLtJ genetisk bakgrunn, de er hemolytisk komplement-mangelfull og bære alleler som negativt påvirker makrofag og dendritiske cellefunksjoner.

Velge en tumorcellevert

Velge den beste verten for en tumorstudie blant disse stammene avhenger av flere faktorer, inkludert:

• Hvilken type svulst vil du engraft— for eksempel en etablert cellelinje, en blodbåren svulst eller en saktevoksende primærtumor?
• Hvor vil du engraft svulsten-for eksempel subkutant eller ortotopisk-og hvordan vil du vurdere veksten?
• Hvor lenge trenger du musene til å forbli engrafted?

Matchende svarene dine på disse spørsmålene til egenskapene til musene som er beskrevet i Den Omfattende Immunodeficient-Pakken, bør betydelig begrense vertsvalgene dine.

Nakenmus

generelt er nakenmus ideelle verter for etablerte, raskt voksende tumorcellelinjer. Fordi de er hårløse, trenger de ikke å være barbert eller depilert for å evaluere veksten av en subkutan tumor. Den hårløse fenotypen gjør også følgende fluorescently merkede celler ved helkroppsbilder veldig enkelt. Men fordi nakenmus fortsatt har B-celle og robuste nk-celleresponser, er de ikke egnede verter for blodbårne kreftformer, som leukemier eller lymfomer. De er også dårlige verter for saktevoksende humane eller mus primære tumorceller eller heterogene tumorfragmenter.

JAX opprettholder levende kolonier av tre forskjellige nude stammer: NU/J (002019) innavlede mus, B6-naken (000819) congenic mus, OG J:NU (007850) outbred nudes. Å være innavlet og congenic, HENHOLDSVIS NU / J OG B6-nudes er genetisk homogene. Derfor er de sannsynlig å støtte mer konsistent tumorvekst. I motsetning, outbred J: NU nudes kan vise mer variabel tumorvekst fordi de er genetisk heterogene. Deres utavlede natur gjør dem imidlertid mer kraftige enn ENTEN NU / J eller B6-nudder, slik at de kan tåle mer invasiv eller alvorlig eksperimentell manipulasjon. FORDI BÅDE NU / J og J: NU mus er albino, kan de foretrekkes for å overvåke tumorvekst ved helkroppsbilder.

scid og Rag-mangelfulle mus

Hvis du skal engraft saktevoksende, etablerte, primære cellelinjer eller blodbårne kreftformer, er scid og Rag-mangelfulle mus bedre valg enn nakne mus. Begge Er T-og B-celle-mangelfulle og derfor mer immunkompromitterte enn nakenbilder. Svulster som vokser bare sta i naken mus sannsynlig vil vokse mer robust i noen av disse stammene.

av de to modellene, scids er trolig mer utbredt som tumor celle verter, muligens fordi de har eksistert i lang tid-siden 1990 – tallet-og er allment tilgjengelig fra de fleste mus leverandører. Imidlertid er de utsatt for «lekkasje», noe som betyr at de kan utvikle lave nivåer av serumimmunoglobuliner (Igs). Slik lekkasje er vanligere hos b6 – (001913) og BALB/c scid (001803) mus, mindre vanlig HOS c3h scid (001131) mus, og minst vanlig hos nod-scid (001303) mus. Det er ikke klart hvilken effekt, om noen, denne lekkasjen har på egnetheten til disse musene som tumorcelleverter. Studier indikerer at repertoaret av antigener som» lekkende » Igs gjenkjenner er lite, og data som knytter lekkasje til vevsavvisning eller dårlig tumorvekst er svak.

av de fire scid-stammene som er nevnt ovenfor, STØTTER NOD scid-mus vanligvis høyere nivåer av engraftment. IMIDLERTID kan nod scid-mus utvikle tymiske lymfomer, noe som begrenser gjennomsnittlig levetid til omtrent 30 uker. DERFOR KAN NOD scid-mus ikke være egnede verter for langsiktige engraftmentstudier.

Fordi Prkdc-protein er involvert I DNA-reparasjon, er scid-mutanter strålingsfølsomme og kan derfor ikke være egnede verter hvis de må bestråles. På den annen side, fordi Ragproteinene ikke er involvert I DNA-reparasjon, Er Rag-mangelfulle mus strålingsresistente. Videre er de ikke » lekkende.»Faktisk Har Rag-mangelfulle mus noen ganger blitt referert til som» ikke-lekkende scids.»

fordi verken scid eller Rag-mangelfulle mus er hårløse, må de barberes eller depileres for å overvåke veksten av en subkutan tumor.

immunsvikt med høyere orden: Foretrukne verter for humane primære svulster

Hvis du skal engraft humane og mus primære svulster, vil du sannsynligvis trenge en større grad av immunsvikt enn det som tilbys av nakne, scid eller Rag-mangelfulle mus. Gjennom årene har flere stammer blitt produsert som kombinerer flere mutasjoner med enten scid eller Rag mangel for å ytterligere undertrykke en mus immunrespons. Disse inkluderer scid beige (Lystbg), NOD scid/(b2-microglobulin (B2m)-mangelfull (002570) og NOD Rag1/perforin 1 (Prf1)-null (004848) mus. Mer nylig, nsg og NRG mus, som kombinerer scid og Rag1 mutasjoner henholdsvis med en mangel i interleukin 2 reseptor gamma kjeden (Il2rg), har blitt utviklet som støtter mer robust post-engraftment tumorvekst som tidligere, dobbelt-mutant mus. Videre beholder menneskelige primære svulster innpodet I nsg-mus mer av deres opprinnelige cytostrukturelle og stromale egenskaper enn når de er innpodet I BALB / c scid-mus. Den uovertruffen immunmangel PÅ nsg-mus har gjort dem til en foretrukket vert for å etablere og passere de menneskelige primære svulstene i VÅR PASIENTAVLEDEDE Xenograft (PDX) Ressurs, som nå inneholder mer enn 200 etablerte lavpassemodeller.

den eneste store ulempen ved bruk AV NSG eller NRG som tumorverter er at musene har hår og må barberes eller depileres for å overvåke veksten av subkutane svulster. Videre, I minst en studie, var NSG-mus for permissive: melanomceller som normalt ikke er tumorigene i en human pasient dannet svulster i denne musen. I den studien ble nod scid-verter funnet å rekapitulere malignitetene som normalt observeres hos humane kreftpasienter.

generelt, jo mer alvorlig immunsupprimerte en mus vert, jo mer sannsynlig er det at tumorcellelinje eller primær tumor vil vokse. I mange tilfeller vil imidlertid en mindre immunkompromittert vert støtte tilstrekkelig tumorvekst. Valget av en immunsvikt vert, da, avhenger sterkt av opprinnelsen til tumorigenic celler og deres typiske vokse rate når transplantert inn i en vert. For ytterligere veiledning i å velge en immunodeficient vert for noen form for tumor engraftment studie, vennligst kontakt Vår Technical Information Services group.